«Чистота 99%» на карточке товара — это утверждение продавца. COA — документ, который это утверждение подтверждает или разоблачает. Разница между ними примерно как между «у меня хорошая машина» и сервисной книжкой. Разобраться в COA можно за десять минут, и это лучшая десятиминутная инвестиция для того, кто покупает пептиды.
Нормальный сертификат анализа занимает одну-две страницы и содержит понятный набор полей: название вещества и его синонимы, аминокислотная последовательность, брутто-формула, расчётная молекулярная масса, номер партии (лота), дата производства и дата анализа, внешний вид, метод анализа с параметрами и результат. Ниже обычно приложены сами картинки — хроматограмма и масс-спектр.
Номер партии — ключевое поле. Он связывает бумагу с конкретным флаконом. Если на флаконе один лот, а в присланном COA другой, документ относится к другому веществу и ничего не подтверждает.
Высокоэффективная жидкостная хроматография разделяет смесь на компоненты. Каждый компонент выходит из колонки в своё время и рисует на графике пик. Чистота считается как площадь основного пика, делённая на сумму площадей всех пиков, и выражается в процентах.
Что смотреть в этой части документа:
ВЭЖХ отвечает на вопрос «насколько чисто», масс-спектрометрия — на вопрос «что именно». Прибор измеряет молекулярную массу, и наблюдаемое значение сравнивается с расчётным для заявленной последовательности. Современные приборы дают точность в единицы ppm, поэтому расхождение в третьем знаке — норма, а расхождение в целых дальтонах требует объяснения.
Типичная ситуация: масса отличается ровно на 18 — это потеря молекулы воды, на 16 — окисление. Такие сдвиги говорят не о подделке, а о состоянии материала, но знать о них полезно.
Это место, где теряются деньги, и о нём почти никто не пишет. Чистота показывает долю целевого пептида среди органических компонентов. Но во флаконе, помимо пептида, есть вода и противоионы — чаще всего трифторуксусная кислота (TFA), остающаяся после очистки. Нетто-содержание пептида (net peptide content) учитывает и их.
Флакон с надписью «10 мг» и чистотой 99% может содержать, например, 8,5 мг собственно пептида, если нетто-содержание составляет 85%. Формально продавец не обманул: масса нетто в граммах верна, чистота верна. Просто это две разные характеристики. Остаточная TFA для исследовательского материала обычно допускается до 1%.
Запрашивайте COA до оплаты и сверяйте номер лота после получения посылки. Нормальный продавец присылает документ по первому запросу — и до, и после покупки. Мы делаем именно так: сертификат на конкретную партию можно попросить у менеджера в любой момент.
Запросить COA на нужную партию
Для исследовательской работы почти нет. Разница в пределах десятых долей процента лежит в зоне погрешности метода и сильно зависит от параметров анализа.
Они отвечают на разные вопросы: масс-спектр подтверждает, что это нужная молекула, ВЭЖХ — сколько в образце посторонних компонентов. Полноценный COA содержит оба.
Заводской COA — норма отрасли. Проверяется он тем же способом: наличием хроматограмм, параметров метода, номера партии и датами, которые меняются от партии к партии.